Invitrogen™ No-Stain™ Protein Etiketleme Reaktifi

Jellerdeki Proteinlerin Anında Görselleştirilmesi

Coomassie ve diğer jel boyama ve leke çıkarma adımları son derece zaman alıcı ve zahmetli olabilir. Lekesiz Protein Etiketleme Reaktifi, tüm proteinler üzerindeki lizin amino asit yan zincirleriyle 10 dakika içinde bir jel içinde kovalent bağlar oluşturur. Lizin en bol bulunan amino asitlerden biri olduğundan, No-Stain reaktifi bir jel veya membran üzerindeki tüm proteinlerin saptanmasını sağlar ve kovalent olarak bağlı reaktiften gelen güçlü sinyal emisyonu nanogram düzeyinde hassasiyet sağlar.

Toplam Protein Normalizasyonu

Toplam protein normalizasyonu, temizlik proteinleri genellikle deneysel koşullardan etkilenebileceğinden, doğru, nicel western blot verileri elde etmek için yararlı bir yöntemdir. Invitrogen Lekesiz Protein Etiketleme Reaktifi, western blot verilerinin toplam protein normalizasyonu için hassas, lineer protein tespiti sağlayan jel transferinden sonra bir membrana uygulanan hızlı, kullanımı kolay, kovalent bir protein etiketleme reaktifidir. Invitrogen Lekesiz Reaktif, bir jeldeki proteinlerin görselleştirilmesi için hızlı, hassas bir jel boyası olarak da kullanılabilir.









 

No-Stain™ Protein Etiketleme Reaktifi

• Esnek kullanım etiketleme formatı—Transfer sonrası zarın toplam protein etiketlemesini gerçekleştirmek için tercih edilen herhangi bir protein jeli ile birlikte kullanın. Veya transfer etmeyi düşünmediğiniz jellerin elektroforezinden sonra hızlı bir protein lekesi olarak kullanın.
• Kullanımı kolay protokol—Transfer edilen membran ile karıştırın ve inkübe edin. Reaksiyon süresi 10 dakikadır. Jel boyama da 10 dakikalık bir reaksiyondur.
• Esnek görselleştirme—Bir görüntü yakalamak için iBright FL1500 Görüntüleme Sistemi de dahil olmak üzere UV, Yeşil LED veya Floresan (~488 mm) ışık kaynağına sahip çok çeşitli görüntüleyiciler kullanın.
• Doğru toplam protein normalizasyonu—Protein tespiti için geniş bir lineer aralıkta doğru toplam protein normalizasyonu sağlamak üzere tasarlanmıştır: Kuyu başına yüklenen 1–80 μg toplam protein.
• Hassas ve kararlı sinyal—Protein bantları 20 ng'ye kadar tespit edilir ve sinyal, aşağı yönde antikor tespiti ile uyumludur.

No-Stain™ Reaktifin Lineerliğinin Temizlik Proteinleriyle Karşılaştırılması

Aşağıdaki şekilde grafik, toplam protein normalizasyonu için Lekesiz Protein Etiketleme Reaktifi kullanılarak oyuk başına yüklenen protein miktarına karşı lineer sinyal tepkisini gösterir. Temizlik proteinlerinden gelen sinyaller, daha yüksek lizat yüklerinde doygun görünmektedir ve sonuçların daha az doğru normalleştirilmesini sağlayacaktır.

























 

No-Stain™ Protein Labelling Reaktifi Özellikler
Reaksiyon Sayısı	Standart bir kit, 40 mini jel boyutunda membran veya 40 mini jel veya ikisinin bir kombinasyonunu etiketleyecektir.
Reaksiyon Zamanı	10 dk.
Jel Uyumluluğu	Herhangi bir jel türüyle (prekast veya kendiniz dökün) veya jel kimyası (Bis-Tris, Tris-glisin, Tris-asetat, Trisin) ile uyumlu
Membran Uyumluluğu	PVDF, nitrocellulose
İmmünodeteksiyon Reaktifi Uyumluluğu	Kemilüminesans veya floresan tabanlı algılama ile tüm alt immün algılama adımlarıyla uyumludur
Uyarma ve Emisyon Maksimumları	Uyarma: ~488 nm (epi mavi ışık), Emisyon: 590 nm
Algılama Hassasiyeti	Bant Başına 20 ng
Linear Aralık	Şerit başına 1 – 80 μg toplam protein yükü
Görüntüleyici Gereksinimleri	UV veya floresan ışık kaynaklarına sahip çok çeşitli görüntüleyicilerle uyumludur, örneğin iBright FL1500 Görüntüleme Sistemi
Nasıl Çalışır?	No-Stain Protein Etiketleme Reaktifi, tüm proteinlerde lizin amino asit yan zincirlerinin bir kısmı ile kovalent bağlar oluşturur
Kit Bileşeni ve Saklama Koşulları	No-Stain Aktivatör (800 µL; saklama -20⁰C); No-Stain Türevleştirici (800 µL; saklama -20⁰C); No-Stain Etiketleme Tamponu, 20X (her biri 2 x 20 mL; depolama 15-30⁰C)
Raf Ömrü	Üretim tarihinden itibaren 1 yıl

Daha fazla bilgi için tıklayınız.