HPLC’de Kolon Ömrü Nasıl Uzatılır?

Kolon ömrü, analitik koşullara ve saklama yöntemine bağlıdır. Burada kolon hasarının nedenlerini ve bunlarla nasıl başa çıkılacağını tanıtıyoruz.

1. Kolonda Kirlilik Birikmesi
Kolondaki kirlilik, pik şekillerini bozar. Bu durumda, lütfen önce kolon yıkamayı deneyin. Örneğin, ters fazlı kolonlar için sağdaki akış şemasını takip edin.

2. Kolon Filtrelerinin Tıkanması
Kolonun her iki ucunda dolgu maddesinin dışarı sızmasını önlemek için filtreler bulunmaktadır. Numunedeki veya hareketli fazdaki çözünmeyen bileşikler bu filtreleri tıkayabilir. Bu durumda, kolon basıncı kademeli olarak artar ve sonunda kolon basıncı hareketli fazı iletmek için çok yüksek hale gelir.

3. Fonksiyonel Grupların Ayrışması
Yüksek konsantrasyonlu asitler veya bazlar bazen alıkonma zamanlarını kısaltır. Bu muhtemelen, fonksiyonel grupların dolgu maddesinin yüzeyinden ayrılmasından kaynaklanmaktadır.

4. Dolgu Maddesinin Bozulması
Bazı çözücüler dolgu maddesini bozar. Örneğin, bazik çözeltiler hidroliz yoluyla silikayı kademeli olarak çözer. Malzeme ve çözücünün kombinasyonuna bağlı olarak polimerler şişebilir. Genel olarak, dolgu madde-sinin bozulması kolon basıncını arttırır ve plaka sayısını düşürür.

5. Dolgu Durumunda Değişiklik
Kolon basıncı maksimum çalışma basıncını aştığında veya aniden dalgalandığında kolondaki partiküllerin dolgu durumunu değiştirebilir. Dolgu durumundaki kusurlar, mobil fazın akışını düzensiz hale getirir, bu da bozuk piklere veya daha düşük plaka sayılarına neden olur.