Yüksek doğruluklu PCR enzimleri, klonlama, dizileme veya mutajenez gibi DNA amplifikasyonu sırasında yüksek doğruluk gerektiren uygulamalar için kullanılır. Thermo Scientific Phusion yüksek kaliteli DNA polimerazları, bir dsDNA-bağlama alanının bir Pyrococcus polimeraz benzeri düzeltme okuma enzimine kaynaştırılmasıyla oluşturulmuştur. Bu benzersiz protein füzyon mühendisliği sayesinde, Phusion DNA Polimerazlar çok düşük hata oranlarına, hızlı genişleme oranlarına ve yüksek inhibitör toleransına sahiptir.

• Yüksek doğruluk—Taq polimerazdan >100 kat daha fazla dizi doğruluğu sağlar
• Kullanışlı kurulum—PCR'de 60°C'lik evrensel tavlama sıcaklığı sağlar
• Gelişmiş özgüllük—sıcak başlatma modifikasyonu, spesifik olmayan amplifikasyonu ve primer bozulmasını azaltır
• Masaüstü stabilitesi—birleştirilmiş reaksiyonların 24 saat kararlılığı sayesinde otomasyon etkinleştirildi
• Yüksek inhibitör toleransı—en düşük saflıkta DNA ile çalışır

Phusion™ Plus DNA Polimeraz

Yeni Phusion Plus reaksiyon tamponu, 60°C'de tavlama adımı sırasında primer/template dublekslerini stabilize eden tescilli katkı maddeleri içerir. Bu benzersiz tampon formülasyonu, her bir primer çifti için tavlama sıcaklığını optimize etmeye gerek kalmadan PCR özgüllüğünü artırarak zamandan tasarruf etmeye ve PCR çalışmalarında hatalardan kaçınmaya yardımcı olur.
Ayrıca, Phusion Plus DNA Polimeraz ve evrensel tavlama özelliği ile aynı protokol kullanılarak farklı PCR reaksiyonları birlikte çevrimlenebilir.

Phusion Plus DNA Polimeraz, Affibody moleküllerinin aracılık ettiği sıcak başlatma mekanizması nedeniyle ortam sıcaklıklarında etkisizdir ve birleştirilmiş PCR reaksiyonlarının oda sıcaklığında kurulmasına ve saklanmasına olanak tanır. Enzim aktivitesi, ilk denatürasyon adımından sonra tamamen geri yüklenir.



PCR reaksiyon kurulumunu basitleştirmek için Phusion Plus DNA Polimeraz, kullanıma hazır ana karışım formatlarında da mevcuttur. Phusion Plus PCR Master Mix, enzim, reaksiyon tamponu, magnezyum klorür ve dNTP'lerin uygun bir 2X karışımıdır. PCR reaksiyonuna yalnızca şablon ve primerlerin eklenmesi gerekir. Phusion Plus Green PCR Master Mix ayrıca PCR ürünlerinin jellere doğrudan yüklenmesi için bir yoğunluk reaktifi ve iki izleme boyası içerir.

Phusion™ Plus PCR Master Mix
Phusion™ Plus Green PCR Master Mix 

Phusion Plus DNA Polimeraz, protein füzyon teknolojisi ile evrensel primer tavlamayı bir araya getiren, sıcak başlangıçlı, yüksek kaliteli bir DNA polimerazdır. Bu, Phusion Plus PCR Master Mix'in yüksek doğruluk, hassasiyet ve inhibitör toleransı ile PCR dizileri oluşturmasını sağlayan, işlemselliği artıran bir alana kaynaşmış Pyrococcus benzeri bir düzeltme okuma DNA polimerazıdır. Yeni reaksiyon tamponu, 60°C'de tavlama aşaması sırasında primer/kalıp dublekslerini stabilize eden tescilli katkı maddeleri içerir. Bu benzersiz tampon formülasyonu, her bir primer çifti için tavlama sıcaklığını optimize etmeye gerek kalmadan PCR özgüllüğünü artırarak zamandan tasarruf etmeye ve PCR çalışmalarında hatalardan kaçınmaya yardımcı olur. Ayrıca, Phusion Plus PCR Master Mix ve evrensel tavlama özelliği ile, aynı protokol kullanılarak farklı PCR reaksiyonları birlikte çevrimlenebilir.










Phusion Plus PCR Master Mix, Affibody moleküllerinin aracılık ettiği sıcak başlatma mekanizması nedeniyle ortam sıcaklıklarında etkin değildir ve birleştirilmiş PCR reaksiyonlarının oda sıcaklığında kurulmasına ve saklanmasına olanak tanır. Enzim aktivitesi, ilk denatürasyon adımından sonra tamamen geri yüklenir.

Uygulamalar

• Yüksek kaliteli PCR (high fidelity)
• Klonlama
• Sıralama için şablon oluşturma
• GC açısından zengin PCR
• Uzun menzilli PCR (20 kb'ye kadar)
• Mutajenez
• Yüksek verimli PCR

Phusion™ Plus DNA Polimeraz & Phusion™ Plus Green PCR Master Mix
Amplikon Boyutu	10 kb genomik DNA, 20 kb düşük karmaşıklıklı DNA
Hot Start	Dahili Hot Start
Fidelity (vs. Taq)	>100X
Ekipmanlarla kullanım	High Fidelity PCR
Format	2X Master Mix
GC-Rich PCR performansı	Yüksek
Overhang	Blunt
Polimeraz	Phusion Plus DNA Polimeraz
Reaksiyon formatı	Kullanıma hazır master mix
Reaksiyon hızı	15-30 s/kb
Kullanım kapasitesi	2000 reaksiyon (50 µL)

 

Phusion™ Plus PCR Master Mix
Amplikon Boyutu	10 kb genomik DNA, 20 kb düşük karmaşıklıklı DNA
Hot Start	Dahili Hot Start
Fidelity (vs. Taq)	>100X
Ekipmanlarla kullanım	High Fidelity PCR
Format	2X Master Mix
GC-Rich PCR performansı	Yüksek
Overhang	Blunt
Polimeraz	Phusion Plus DNA Polimeraz
Reaksiyon formatı	Kullanıma hazır master mix
Reaksiyon hızı	15-30 s/kb
Kullanım kapasitesi	500 reaksiyon (50 µL)

İçerik&Saklama Koşulları

Phusion™ Plus DNA Polimeraz

Her biri aşağıdakileri içeren dört paket:

• Phusion Plus DNA Polimeraz, 250 µL
• 5X Phusion Plus Tampon, 5 x 1.25 mL
• 5X Phusion GC Enhancer, 4 x 1.25 mL
• 25°C ila -15°C arasında saklayın

Phusion™ Plus PCR Master Mix

• 2X Phusion Plus PCR Master Karışımı, 10 x 1.25 mL
• 5X Phusion GC Enhancer, 4 x 1.25 mL
• Su, 10 x 1,25 mL
• 25°C ila -15°C arasında saklayın

Phusion™ Plus PCR Green Master Mix

Her biri aşağıdakileri içeren dört paket:

• 2X Phusion Plus Yeşil PCR Ana Karışım, 10 x 1.25 mL
• 5X Phusion GC Enhancer, 4 x 1.25 mL
• Su, 10 x 1,25 mL
• 25°C ila -15°C arasında saklayın

Daha fazla bilgi için tıklayınız.