Protein elektroforez nedir? Protein elektroforezi, yüklü protein moleküllerinin bir elektrik alanı ile bir çözücü aracılığıyla taşındığı standart bir laboratuvar tekniğidir. Hem proteinler hem de nükleik asitler, basit, hızlı ve hassas bir analitik araç olan elektroforez ile ayrılabilir.
Poliakrilamid jeller nelerdir? Poliakrilamid, proteinleri boyutlarına göre ayırmak için elektroforetik jeller hazırlamak için tercih edilen malzemedir. Poliakrilamid jeller, polimerleştirici madde, amonyum persülfat (APS) eklendiğinde çapraz bağlı bir polimer ağı oluşturmak için akrilamid ile bisakrilamid karıştırılarak hazırlanır.
SDS-PAGE'de jel, anyonik bir deterjan olan sodyum dodesil sülfat (SDS) içeren bir tampon içine dökülür. SDS, polipeptit omurgasını sararak proteinleri denatüre eder. Protein numunesinin fazla SDS ve tiyol reaktifi varlığında 70-100°C arasında ısıtılmasıyla disülfid bağları parçalanır ve protein tamamen alt birimlerine ayrılır.
Western blot (immünoblot), protein biyolojisi, immünogenetik, moleküler biyoloji gibi alanlarda protein solüsyonu içerisinde protein saptama ve spesifik proteinlerin tanımlanmasında yaygın olarak kullanılan bir yöntemdir.
Western blot tekniği, antikor tespitinin özgüllüğü ile jel elektroforezinin rezolüsyonunu bir araya getiren bir yöntemdir.
Western Blot Aşamaları: Örnek hazırlama, Jel elektroforez, Proteinlerin membrana transferi, Antikor inkübasyonu, Görüntüleme ve analiz
Western Blot nasıl uygulanır?
Protein tanımlamada kolorimetrik, kemilüminesan, floresan tanımlama
Western blot iş akışındaki kilit adımlardan biri, elektroforezden sonra poliakrilamid jelden proteinlerin nitroselüloz veya poliviniliden diflorür (PVDF) zarına aktarılmasıdır, böylece spesifik proteinler bağışıklık algılama teknikleri kullanılarak tespit edilebilir.
Siz isteyin biz gerçekleştirelim… Ant Teknik 1999’dan bu yana laboratuvar cihazları satış, teknik destek ve eğitim hizmetleri sunuyor; anahtar teslim projeler gerçekleştiriyor.
m/z nedir? S/N oranı nedir? OQ nedir, neleri kapsar? Analitik laboratuvar çalışanları olarak en çok merak ettikleriniz…
Analitik laboratuvarlarda kromatografi, spektroskopi tekniklerini kullanırken yararlanabileceğiniz ipuçları, karşılaşabileceğiniz sorunlar ve çözümleri ile ilgili uzman önerileri...
